開發(fā)小粒徑填料的優(yōu)勢在于能實(shí)現(xiàn)更高的分離效率和分辨率。當(dāng)粒徑從5 μm降至3 μm時，柱效幾乎為原先的兩倍。如圖1和表1所示：當(dāng)填料粒徑從5 μm降至3 μm時，BSA二聚體、BSA、核糖核酸酶A的塔板數(shù)分別從2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。圖2和表2進(jìn)一步表明3 μm Zenix柱在分離各種蛋白時能實(shí)現(xiàn)更高的分離效率。P-氨基苯甲酸使用30 cm長的Zenix柱時能夠達(dá)到40,000的塔板數(shù)。

圖1. Zenix SEC-300和SRT SEC-300分離蛋白混合物A

色譜柱：Zenix SEC-300和SRT SEC-300

流動相：150mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0

流速：7.8x300 mm為1.0 mL/min; 4.6x300 mm為0.35 mL/min

溫度：室溫（~23℃）

檢測器：UV 214 nm

進(jìn)樣量：10 μL （4.6x300 mm為3 μL）

樣品： 1） 甲狀腺球蛋白（1.0 mg/mL）, 670 kD; 2） BSA二聚體, 132 kD; 3） BSA （1.0 mg/mL）, 66 kD; 4） 核糖核酸酶A （1.0 mg/mL）, 13.7 kD; 5） 尿嘧啶（2.5 μg/mL）, 120 D

表1. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率

圖2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率 （內(nèi)徑為7.8 mm）

色譜柱：Zenix SEC （7.8x300 mm, 3 µm）

流動相：150 mM PBS, pH 7.0

流速：1.0 mL/min

反壓：Zenix SEC-300為1,375 psi, Zenix SEC-150為1,100psi

溫度：室溫（~ 23℃）

檢測波長：214 nm

進(jìn)樣量：10 μL

樣品：1）甲狀腺球蛋白 （1.0 mg/L）, 670 kD; 2）BSA二聚體, 132 kD; 3） BSA （1.0 mg/L）, 66 kD; 4）核糖核A （1.0 mg/L）, 13.7 kD; 5） 尿嘧啶 （2.5 μg/mL）, 120 D

表2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率

　　載樣量是衡量體積排阻色譜柱性能的重要指標(biāo)之一，下圖表明Zenix系列分析色譜柱在BSA上樣量高達(dá)500 µg的情況下，仍保持著完美的分析峰形。

圖3. Zenix SEC-150 色譜柱對BSA載樣量的測試圖譜

色譜柱：Zenix SEC-150 （3 µm, 7.8x300 mm）

流動相：150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0

流速：1.0 mL/min

進(jìn)樣量：10 µL

檢測器：UV 214 nm

圖4. Zenix SEC-300 色譜柱對BSA載樣量的測試圖譜

色譜柱：Zenix SEC-300 （3 µm, 7.8x300 mm）

流動相：150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0

流速：1.0 mL/min

進(jìn)樣量：10 µL

檢測器：UV 214 nm

　　賽分科技獨(dú)有的表面修飾技術(shù)使得硅膠表面的鍵合密度達(dá)到最大化，從而阻止了能夠促進(jìn)鍵合相脫落的溶劑分子向薄膜內(nèi)側(cè)的擴(kuò)散，保證了其在pH 2-8.5范圍的穩(wěn)定使用。Zenix體積排阻柱適用于大多數(shù)水性及有機(jī)溶劑，包括：醋酸、磷酸、Tris緩沖鹽體系、甲醇、乙醇、THF、DMF、DMSO等，同時可耐受高鹽溶液，如2.0 M的NaCl。

　　Zenix SEC固定相能與大多水相緩沖液兼容，如醋酸銨、磷酸鹽、Tris等。Zenix SEC固定相能夠承受高濃度鹽，如2.0 M。同時Zenix SEC柱在有機(jī)溶劑中，如甲醇、乙醇、四氫呋喃、2,5-二甲基呋喃、二甲基亞砜等，水和有機(jī)溶劑混合相中均能保持穩(wěn)定。

　　Zenix SEC固定相為親水性和中性，蛋白和其他生物分子與固定相之間的非特異性吸附可忽略?？梢种频鞍孜降焦枘z固定相表面的作用，從而能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白高的回收率，在分離后能夠保持蛋白的活性。酸性和堿性蛋白的代表BSA和溶菌酶的回收率能夠高于95%。